杭州地坪漆环氧地坪漆荧光底物的选择在荧光酶联免疫技术中对荧光底物有着严格的要求,应符合以下条件。(1)稳定要好在条件下保存时间长,不产生非酶解的荧光底物,性质稳定。(2)酶催化作用速度快。(3)生成产物稳定并有强荧光。
具有宽的Stokes位移,并倾向选用激发光波长较长者,因为低能量的激发产生较低的荧光本底。碱性磷酸酶(AP)、辣根过氧化物酶(HRP)及B—D一半乳糖苷酶是ELFIA法中应用广泛的三种酶。四甲基伞形酮磷酸酯(4一MUP)被广泛用于AP酶的荧光底物。近来,5一氟水杨酸的磷酸酯被用作时间分辨法测定AP酶活性的荧光底物,当发生酶催化水解时,水解产物在碱性溶液中与Tb3+一EDTA形成强荧光配合物。测定HRP的灵敏的荧光法基于过氧化氢与对羟基苯乙酸之间的氧化反应,当使用对羟基苯丙酸时灵敏度高。四甲基伞形酮一p—D一半乳糖是p—D一半乳糖苷酶荧光底物的选择。上述底物的荧光反应如图8—5所示。
其中四甲基伞形酮磷酸酯及5一氟水杨酸磷酸酯用作AP的荧光底物;对羟基苯丙酸和四甲基伞形酮一p—D一半乳糖苷分别用作HRP和Gal的荧光底物。龚福春等近期合成了一种新型辣根过氧化物酶(HRP)荧光底物一4一羟基苯乙基吡啶(pHSP),并将它运用于荧光酶联免疫体系。